Corso di laurea: Biologia sanitaria Programmazione per l'A.A. 2013/2014

La fase pre-analitica in microbiologia:a) richiesta del medico, scelta degli esami, preparazione del paziente, raccolta e trasporto del campioneLa fase analitica:a) Esame colturale, Identificazione dei microrganismi e referto.2. Batteriologia speciale: Il concetto di specie in batteriologia e la classificazione dei batteri di interesse medicoa) Stafilococchib) Streptococchic) Enterococchid) Corinebatteri, Listeriae) Enterobatterif) Pseudomonas, Burkolderia, Acinetobacter e batteri gram negativi rarig) Micobatterih) Vibrio, Campylobacter, Helicobacteri) Haemophilus, Bordetella e Brucellaj) Yersiniak) Neisseriael) Anaerobi e bacilli sporigenim) Legionellan) Micoplasmi, Rickettsiae e Chlamidiaeo) Spirochete

• Antonelli, Clementi, Pozzi, Rossolini : Principi di Microbiologia medica – Ed. Ambrosiana
• La Placa : Principi di Microbiologia Medica – Ed. Esculapio
• Jawetz, Melnick, Adelberg’s: Microbiologia medica – Ed. Piccin

Rapporti tra specie: simbiosi, parassitismo, coevoluzioneBiologia dei parassiti: adattamenti alla vita parassitaria; azione dei parassiti sugli ospitiParassitologia e mobilità umanaProtozoi: generalità; caratteristiche, cicli biologici, con cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, dei seguenti parassiti: Leishmania spp., Trypanosoma cruzi, Tripanosoma brucei gambiense e T.b. rhodesiense; Giardia spp., Trichomonas spp.; Ameba spp.; Balantidium coli; Toxoplasma gondii, Plasmodium spp.Platelminti: generalità; caratteristiche, cicli biologici, cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, di: Schistosoma spp., Fasciola hepatica, Opistorchis felineus, Paragonimus westermanii (Trematodi); Taenia spp., Echinococcus granulosus, Dyphillobotrium latum, Dypilidium caninum, Hymenolepis nana (Cestodi).Nematodi: generalità; caratteristiche, cicli biologici, cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, dei seguenti parassiti: Ancylostoma duodenalis, Necator americanus, Trichiuris trichura, Ascaris lumbricoides, Enterobius vermicularis, Dracunculus medinensis, Trichinella spp., Strongyloides stercoralis, Wuchereria bancroftii, Loa loa, Onchocerca volvolus.Artropodi: generalità; caratteristiche, cicli biologici, con cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, di Acari e Insetti parassiti (Anoplura, Siphonaptera).

- De Carneri - Parassitologia generale e umana
Casa Editrice Ambrosiana, Milano – a cura di Claudio Genchi ed Edoardo Pozio
- De Carneri – Parassitologia medica e diagnostica parassitologica
Casa Editrice Ambrosiana, Milano – a cura di Olga Brandonisio, Fabrizio Bruschi, Claudio Genchi ed Edoardo Pozio
- Schmidt G.D., Roberts L.S. – Foundations of Parasitology
Mc Graw Hill – Higher Education

Identificazione dei geni patologici nell’uomoMappaggio genetico dei caratteri mendeliani nell’uomo. Studi di linkage. Metodi di mappaggio fisico. Metodi di mappaggio fisico ad alta risoluzione. Clonaggio posizionale. Clonaggio funzionale. L’esempio del gene della distrofia muscolare e della fibrosi cistica. Linkage disequilibrium. Clonaggio posizionale per gene candidato.Il progetto genoma umano: le tappe principali, implicazioni scientifiche, etiche e sociali.Genetica molecolare delle malattie umaneGenetica molecolare delle emoglobinopatie. Organizzazione funzionale e strutturale dei geni globinici. Mutazioni che causano alterazioni quantitative e qualitative dell’emoglobina. Basi molecolari delle talassemie e delle emoglobinopatie.Mutazioni da espansione instabile di ripetizioni. Caratteristiche genetiche delle malattie da mutazioni dinamiche. Il fenomeno dell’anticipazione. Approfondimenti sulla sindrome dell’X fragile.ImmunogeneticaSpecificità della risposta immunitaria. Cellule o organi specializzati del sistema immunitario. L’immunità umorale e cellulare. La specificità degli anticorpi e dei recettori delle cellule T.La selezione clonale: ontogenesi delle cellule B e T. La risposta della cellula B: struttura e funzione degli anticorpi. Le catene leggere e pesanti. Associazione combinatoria. Le famiglie multigeniche.L’unione V-J e V-D-J. La diversità al punto di unione, le regioni N, ipermutazione somatica. Regolazione dei riarrangiamenti. Anticorpi di membrana e di secrezione. La commutazione da IgM a IgD. La commutazione di classe oltre la IgD. Le interazioni con altre cellule del sistema immunitario. La risposta della cellula T. Geni e prodotti dell’MHC. Evoluzione della famiglia supergenica delle immunoglobuline.La genetica dei tumoriIl cancro. La cellula tumorale. Oncogeni virali e cellulari. Meccanismi di attivazione degli oncogeni cellulari. Traslocazioni cromosomiche e cancro. Funzioni delle proteine codificate dagli oncogeni. Ruolo degli oncogeni nella trasformazione cellulare.Geni oncosoppressori e tumori ereditari: il modello del retinoblastoma. Le proteine codificate dai geni oncosoppressori e la loro funzione nella fisiologia cellulare.micro RNA, ruolo fisiologico e nella patogenesi del cancro ( seminario)









































































































Locked="f

-R.L. Nussbaum, R.R. McInnes, H.F. Willard (2005),Thompson & Thompson Genetica in medicina, ed. Idelson-Gnocchi

-P.J Russell ( 2010)Genetica. Una prospettiva Molecolare, ed.Pearson

B. Lewin et al ( 2011) Il gene,edizione compatta, ed Zanichelli

Goldsby R.A, Kindt T.J. Kuby Immunologia (2007) UTET

- Strachan e A.P. Read (2007), Genetica Molecolare Umana, ed.UTET

Materiale didattico fornito dal docente

Breve riepilogo sulla struttura delle proteine: legame peptidico, struttura primaria, secondaria terziaria e quaternaria. Strutture supersecondarie. Concetto di dominio strutturale e funzionale. Il riavvolgimento delle proteine (protein folding). La termodinamica del fodling. Spontaneità del processo di folding. Il ruolo dei ponti -S-S- nella stabilizzazione delle strutture intermedie. Il “molten globule”. Il paradosso di Anfisen. Il folding assistito: le chaperonine. Classificazione delle chaperonine batteriche ed eucariotiche. Struttura e funzione di Gro-Es e Gro-El. Le chaperonpatie: esempi di patologie ereditarie basate sul “misfolding” proteico.Le mutazioni puntiformi: relazione tra modifiche strutturali e modifiche funzionali delle proteine. Le malattie rare: gli errori congeniti del metabolismo (IEM). Esempi di IEM correlati al metabolismo del glicogeno, al metabolismo di purine e pirimidine, al metabolismo degli acidi organici, al metabolismo degli amminoacidi e dell’N-acetilaspartato (NAA).Approcci per la diagnosi biochimico-clinica di IEM. Principali tecniche analitiche utili per la diagnosi biochimico-clinica di IEM. Le diagnosi prenatali e le diagnosi neonatali. Screening ristretti e screening allargati.Concetto di biomarker. Esempio di biomarkers comuni in biochimica clinica nella patologia diabetica: differenze tra la glicemia e l’HbA1-c. Ricerca di nuovi biomarkers in biochimica clinica per la diagnosi e prognosi di malattie neurodegenerative acute e croniche. Alterazioni biochimiche comuni in patologie neurodegenerative acute e croniche: il trauma cranico e la sclerosi multipla. L’NAA come biomarker di funzionalità neuronale. Nozioni sull’omeostasi dell’NAA.

Struttura e funzione delle proteine, Petsko e Ringe, Zanichelli; più materiale ad hoc che verrà distribuito durante il corso delle lezioni.

Sicurezza nel laboratorio di biologia molecolare clinica. Introduzione alle tecniche del DNA ricombinante. Purificazione e quantificazione degli acidi nucleici. Elettroforesi di macromolecole biologiche. Uso delle centrifughe. Uso delle principali nucleasi e di sonde molecolari. Clonaggio di molecole di DNA e produzione di specifiche proteine d’interesse terapeutico. Uso dellle tecniche di PCR a Real-Time PCR. Analisi degli RFLP . Tecniche di sequenziamento del DNA. Uso dei Chip e degli Array.

Prima parte:• Sviluppo delle conoscenze embriologiche• La riproduzione: caratteristiche generali• Tappe dello sviluppo embrionale e loro significato• Formazione degli assi embrionali in invertebrati e vertebrati• La gametogenesi: generalità• I protogoni: origine e loro comportamento• Plasma germinale e determinazione delle cellule germinali negli invertebrati e nei vertebrati• Migrazione delle cellule germinali• Spermatogenesi e spermioistogenesi• Ciclo dell’epitelio seminiferoMorfologia ed ultrastruttura del gamete maschile dei mammiferiIl processo di capacitazioneInfluenza ormonale nella maturazione del gamete maschileAspetti degenerativi dello spermatozooOrganizzazione e differenziamento del testicolo: struttura del tessuto interstiziale e del tubulo seminifero.• OogenesiOrganizzazione morfologica e strutturale del gamete femminile dei mammiferiLa follicologenesi , evoluzione del follicolo dopo l’ovulazione, atresia follicolareControllo ormonale della oogenesiAccrescimento dell’uovoRivestimenti ovulari dei mammiferi: struttura e funzioneOrganizzazione e differenziamento dell’ovario: generalità• La fecondazione: caratteristiche generaliFenomenologia della fecondazione nei mammiferi:chemiotassi, interazione tra i gameti, reazione acrosomale, penetrazione dello spermatozoo attraverso gli involucri ovulari, attivazione della cellula uovo• La segmentazione: generalitàMeccanismi di segmentazione: aspetti morfologici e molecolariLocalizzazioni citoplasmatiche dell’uovo e loro segregazioneLa segmentazione nei mammiferi: caratteristiche generali,compattazione, estrusione dalla zona pellucidaTrasporto dell’embrione durante la segmentazioneImpianto e deciduazioneOrganizzazione cellulare nel corso della embriogenesiI morfogeni e loro modalità di azione• La gastrulazioneMovimenti morfogenetici: formazione ed evoluzione dei tre foglietti embrionali• La neurulazione nei mammiferi• Ruolo degli ormoni nel differenziamento sessuale dei mammiferi• Annessi embrionali: organizzazione, struttura e funzione• Trapianti nucleari• Sviluppo a mosaico e sviluppo regolativoLa poliembrionia nei mammiferi• Induzione embrionale, attività molecolari nella specificità regionale dell’induzione• Specificazione, determinazione e differenziamento. I determinanti: loro localizzazione, composizione e modalità di azioneInterazioni cellulari in vicinanza ed interazioni cellulari a distanza.Seconda parte:• Topografia dell’apparato genitale femminile e maschile• Cenni di fisio-patologia dell’apparato genitale maschile e femminile• La sterilità e l’infertilità di coppia: dalla diagnosi alle terapie• Tecniche di medicina della riproduzione umana (P.M.A.)• Meccanismi e metodologie della stimolazione ovarica• Tecniche di diagnosi prenatale (amniocentesi ed analisi di globuli rossi fetali prelevati da sangue materno)• La fecondazione assistita:generalità e cenni storici• Organizzazione del laboratorio di fecondazione assistita:apparecchiature e terreni di coltura per gameti ed embrioni• Indagine di laboratorio del fattore maschile e prove di trattamento per ART. • Preparazione del seme per inseminazione intrauterina• Preparazione del liquido seminale per FIVET ed ICS (Fecondazione In Vitro Embrio Trasfer / Intra Citoplasmatica Spermio Iniezione)• Preparazione del fluido seminale per ICS• Preparazione dei terreni di coltura:• prelievo ovocitario ed inseminazione degli ovociti con la tecnica FIVET• Il micromanipolatore ed inseminazione degli ovociti con la tecnica ICS• Controllo della fertilizzazione degli ovociti e valutazione morfologica degli embrioni umani prima del trasfer:• tecnica di apertura della zona pellucida ed aspirazione dei frammenti citoplasmatici embrionali con il micromanipolatore (AHA: Assisted Hatching)• Il futuro: le cellule staminali• La diagnosi genetica di preimpianto ( PGD ) e la diagnosi pre-concezionale (PCD):• Diagnosi genetica di preimpianto : Principi e obiettivo• Storia della diagnosi genetica di preimpianto• Campi di applicazione : Malattie genetiche e cromosomiche a trasmissione ereditariaMalattie genetiche legate al sesso• Tecniche utilizzate : Fecondazione in vitro e biopsia embrionaria• Tecniche d’analisi genetica: PCR PrincipioMateriale e metodi Caratteristiche del laboratorio di DGPProblematica : Allele dropout Diagnosi Genetica Un esempio : Applicazione clinica della DGP per la -talassemia e la drepanocitosi FISH e CGH PrincipioMateriale e metodiApplicazioni• La Diagnosi genetica di preimpianto nel mondoApplicazione alternative della diagnosi genetica di preimpianto DGP e HLA typing DGP e predisposizione familiare al cancro DGP e selezione del sesso• Diagnosi preconcezionale : Caratteristiche generaliBiopsia del primo e secondo globulo polareTecniche d’analisi genetica, campi di applicazione e limiti• I limiti imposti dalla legge sulla diagnosi genetica di preimpianto e la diagnosi preconcezionaleConclusioni• La crioconservazione nella fecondazione in vitroCaratteristiche generali della crioconservazione• Il liquido seminale Materiale e metodi Applicazione cliniche• L’ovocita Materiale e metodi Applicazione cliniche• L’embrione Materiale e metodi Applicazione cliniche

Andreuccetti et al., Biologia dello sviluppo – McGraw-Hill ;
Gilbert- Biologia dello sviluppo –Zanichelli; P. Rosati –Embriologia generale dell’uomo – edi-ermes;
A Comparative Overview of Mammalian Fertilization – edited by Dunbar and O’Rand;
The Biological Basis of Early Human Reproductive Failure – edited by Van Blerkom

Parte I – Biologia Cellulare- Adesione cellulare.Generalità; organizzazione molecolare della superficie cellulare e della matrice extracellulare. Evoluzione dei meccanismi di adesione. Adesione cellula-cellula ed adesione cellula-matrice.Le molecole protagoniste dell’adesione cellulare: immunoglobuline, caderine, integrine, selectine. Interazioni ontogenetiche delle molecole di adesione.- Le cellule staminali:Generalità e cenni storici. Potenzialità differenziative delle cellule staminali.Cellule staminali embrionali (CSE).Cellule staminali germinali embrionali.Cellule staminali fetali.Cellule staminali amniotiche.Cellule staminali adulte (CSA).- Cellule staminali del midollo osseo: cellule staminali ematopoietiche e cellule staminali stromali.- Cellule staminali del cordone ombelicale.- Cellule staminali epiteliali.- Cellule staminali neuronali.La riprogrammazione nucleare:- Trasferimento nucleare (Somatic cell nuclear transfer, SCNT).- Fusione cellulare- Trasduzione dei fattori di trascrizione (Induced programmed stem cells, IPSc) Clonazione e clonazione terapeutica.Medicina rigenerativa.- Morte cellulare:Cenni storici sullo sviluppo del concetto di morte cellulare.Necrosi e suoi meccanismi.Morte cellulare programmata: apoptosi e anoikis. Alterazioni morfologiche dell’apoptosi. Fisiologia ed eventi biochimici dell’apoptosi. Vie di induzione dell’apoptosi. Modelli di studio dei processi apoptotici.

Cellule, B. Lewin et al., Ed. Zanichelli, 2008.

Fisiopatologia del sistema immunitario:Tolleranza e autoimmunità, riconoscimento del self e non self.Immunità contro i tumori e i trapianti, Risposte nei confronti di cellule trasformate e allogeniche.Ipersensibilità e malattie ad esse correlate.Immunodeficienze congenite e acquisite con relativa classificazione delle malattie causate da carenze di risposta immunitaria.Principali tecniche di laboratorio di uso comune in immunopatologia

Caratteristiche degli ormoni. Ormoni e tumori. Neuroendocrinologia. Ipotalamo.Ipofisi, Neuroipofisi. Fattori ipofisiotropi ipotalamici.Adenoipofisi. Ormoni dell’adenoipofisi e loro azione metabolica.Tiroide. Ormoni della tiroide. Azione ddegli ormoni tiroidei. TSH.Ghiandole surrenali. Controllo della secrezione surrenalica.Ghiandole paratiroidi. Il metabolismo del calcio.Gli ormoni sessuali.Il pancreas endocrino.Effetti fisiologici dell’insulina. Diabete.Organizzazione anatomo-funzionale del SNC.Sistema somatosensoriale, psicofisica delle sensazioni. Substrato anatomico della sensibilità somatica. Corda spinale. Sistema sensitivo ascendente. Fibre delle corna spinali. Laminazione spinale. Somatotopia spinale.Il talamo. Nuclei a proiezione specifica, associativi e a proiezione aspecifica.Vie della sensibilità somatica. Sistema anterolaterale. Sistema lemniscale. Sistema trigeminale.Corteccia cerebrale. Anatomia della corteccia. Cellule corticali. Potenziali evocati, primari e secondari. Codificazione dello stimolo periferico. Somatotopia corticale.Il dolore. Rappresentazione centrale del dolore. Analgesia.Sistemi motori. Circuiteria dei sistemi motori. Corda spinale, talamo, aree corticali. Interneuroni. Vie motici. Motoneuroni.I nuclei della base. Lloro connessioni efferenti ed afferenti. Morbo di Parkinson’s.Cervelletto. Anatomia dell cervelletto. Organizzazione cellulare. Afferenze. Vestibolo cerebellare: afferenze ed efferenze. Spinocerebello:afferenze ed efferenze, informazioni somatosensoriali. Cerebrocerebello. Patologie cerevellari.Apprendimento e memoria.Sistema nervoso vegetativo.Riflessi condizionati.

Testi forniti dal docente

Metodologia EpidemiologicaPublic Health per il trasferimento delle acquisizioni della ricerca negli interventi di prevenzione e promozione della salute e nelle policies. Demografia e biostatistica per l’approccio epidemiologico. Fonti e modalità di raccolta dei dati. La definizione di caso. Elaborazione e presentazione dei dati. Misure di frequenza (tassi grezzi e specifici, tassi standardizzati, prevalenza, l’incidenza cumulativa o rischio e il tasso di incidenza). Indicatori delle condizioni di salute della popolazione: fecondità, natalità, speranza di vita, mortalità, mortalità infantile, neonatale e perinatale, letalità, tasso di sopravvivenza, eventi sentinella.Misurare gli eventi: importanza di un denominatore - proporzioni e tassi - definizione di prevalenza - definizione di incidenza - densità di incidenza. Tassi grezzi e specifici - esempi di tassi quali indicatori demografici e sanitari (mortalità, natalità, mortalità infantile, ecc.) – standardizzazione dei tassi con metodo diretto e indirettoIl campionamento: significato degli studi campionari - metodi di campionamento - cos'è l'inferenza statistica.Studiare le relazioni causa-effetto: Basi concettuali del disegno dello studio epidemiologico - studio pilota - impostare uno studio epidemiologico - metodologie di indagine – gli studi descrittivi – gli studi ecologici – gli studi trasversali - gli studi di coorte - gli studi caso-controllo - le misure di associazione. La valutazione del rischio: fattori di rischio (componenti genetiche, ambientali e comportamentali). Rischio assoluto, relativo e attribuibile. Misure di associazione e rapporto causa-effetto. Inferenza causale e fattori di confondimento. Misure di impatto sulla popolazione. Fattori di rischio multipli e interazione. Bias e confondenti negli studi analitici - OR "aggiustati" - cenni sulle analisi multivariate. Interpretare i risultati di uno studio analitico - significato dell'associazione fra fattori di rischio e patologie - misure di impatto sulla popolazione (rischio attribuibile, frazione eziologica, ecc).Epidemiologia sperimentale: gli studi sperimentali - efficacia clinica - modelli di studio sperimentale (trial preventivi, field trials e community trials; trial clinici).Gli screening: significato di prevenzione secondaria - modelli di screening - valutare la validità di un test in funzione dello screening: sensibilità, specificità, valore predittivo. Valutazione del target dello screening. Calcolo del NNT, NNS.L'indagine su un’epidemia: studio di un'epidemia - metodi di analisi dei dati – curva epidemica. Il protocollo operativo. La gestione degli outbreak.L’indagine sui cluster di eventi sanitari: definizioni ed esempi – identificazione di un cluster - limiti delle indagini su cluster di eventi sanitari – analisi dei dati.I questionari in epidemiologia: preparare un questionario - organizzare i dati per l'input - validare le risposte.Epidemiologia delle vaccinazioni: Le origini delle basi scientifiche della vaccinazione. Modelli sperimentali di vaccinologia. La sorveglianza del tasso di copertura vaccinale. Possibili obiettivi dei programmi di vaccinazione: protezione dell’individuo a rischio; controllo; eliminazione; eradicazione. Valutazione di efficacia ‘sul campo’ delle vaccinazioni.Journal club revisione critica di recenti articoli della letteratura epidemiologica internazionaleLaboratorio di Epidemiologia applicata IgieneEpidemiologia e prevenzione delle infezioni del tratto respiratorio Epidemiologia e prevenzione delle infezioni trasmesse per via parenterale o sessualeEpidemiologia e prevenzione delle infezioni veicolate dagli alimenti e zoonosiEpidemiologia e prevenzione delle infezioni emergenti e trasmesse da vettori Epidemiologia e prevenzione delle infezioni prevenibili mediante vaccinazioneEpidemiologia e prevenzione delle infezioni acquisite in ambito assistenziale (HAI, hospital acquired infections). I programmi di sorveglianza e i network nazionali ed europei.Epidemiologia e prevenzione delle malattie cardiovascolariEpidemiologia e prevenzione del diabete mellito e dell’obesitàEpidemiologia e prevenzione dei tumori maligni Prevenzione preconcezionale e prenatale Indicatori di salute materna. Mortalità - Morbosità - Abortività.Le malformazioni congenite Approccio metodologico: il disegno dello studio epidemiologico. Impatto dell’alimentazione sull’incidenza dei difetti congeniti (difetti del tubo neurale, spina bifida, schisi orali). Sindrome di Down. Suscettibilità genetica. Interventi di prevenzione.Genomica in Sanità pubblica Le 4 fasi della ricerca traslazionale. I modelli di valutazione dei test genetici/genomici.

F Faggiano, F Donato, F Barbone. Manuale di Epidemiologia per la Sanità Pubblica. Centro Scientifico Editore
PL Lopalco, AE Tozzi Epidemiologia facile. Il Pensiero Scientifico Editore
Checcacci L, Meloni C, Pellissero G.: IGIENE Casa Editrice Ambrosiana

Farmacologia generale (farmacodinamica, farmacocinetica), farmacologia cellulare e molecolare, farmacologia dei sistemi fisiologici integrati, concetti essenziali di chemioterapia.

La fase pre-analitica in microbiologia:a) richiesta del medico, scelta degli esami, preparazione del paziente, raccolta e trasporto del campioneLa fase analitica:a) Esame colturale, Identificazione dei microrganismi e referto.2. Batteriologia speciale: Il concetto di specie in batteriologia e la classificazione dei batteri di interesse medicoa) Stafilococchib) Streptococchic) Enterococchid) Corinebatteri, Listeriae) Enterobatterif) Pseudomonas, Burkolderia, Acinetobacter e batteri gram negativi rarig) Micobatterih) Vibrio, Campylobacter, Helicobacteri) Haemophilus, Bordetella e Brucellaj) Yersiniak) Neisseriael) Anaerobi e bacilli sporigenim) Legionellan) Micoplasmi, Rickettsiae e Chlamidiaeo) Spirochete

• Antonelli, Clementi, Pozzi, Rossolini : Principi di Microbiologia medica – Ed. Ambrosiana
• La Placa : Principi di Microbiologia Medica – Ed. Esculapio
• Jawetz, Melnick, Adelberg’s: Microbiologia medica – Ed. Piccin

Rapporti tra specie: simbiosi, parassitismo, coevoluzioneBiologia dei parassiti: adattamenti alla vita parassitaria; azione dei parassiti sugli ospitiParassitologia e mobilità umanaProtozoi: generalità; caratteristiche, cicli biologici, con cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, dei seguenti parassiti: Leishmania spp., Trypanosoma cruzi, Tripanosoma brucei gambiense e T.b. rhodesiense; Giardia spp., Trichomonas spp.; Ameba spp.; Balantidium coli; Toxoplasma gondii, Plasmodium spp.Platelminti: generalità; caratteristiche, cicli biologici, cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, di: Schistosoma spp., Fasciola hepatica, Opistorchis felineus, Paragonimus westermanii (Trematodi); Taenia spp., Echinococcus granulosus, Dyphillobotrium latum, Dypilidium caninum, Hymenolepis nana (Cestodi).Nematodi: generalità; caratteristiche, cicli biologici, cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, dei seguenti parassiti: Ancylostoma duodenalis, Necator americanus, Trichiuris trichura, Ascaris lumbricoides, Enterobius vermicularis, Dracunculus medinensis, Trichinella spp., Strongyloides stercoralis, Wuchereria bancroftii, Loa loa, Onchocerca volvolus.Artropodi: generalità; caratteristiche, cicli biologici, con cenni di epidemiologia, lotta e prevenzione, di Acari e Insetti parassiti (Anoplura, Siphonaptera).

- De Carneri - Parassitologia generale e umana
Casa Editrice Ambrosiana, Milano – a cura di Claudio Genchi ed Edoardo Pozio
- De Carneri – Parassitologia medica e diagnostica parassitologica
Casa Editrice Ambrosiana, Milano – a cura di Olga Brandonisio, Fabrizio Bruschi, Claudio Genchi ed Edoardo Pozio
- Schmidt G.D., Roberts L.S. – Foundations of Parasitology
Mc Graw Hill – Higher Education

Identificazione dei geni patologici nell’uomoMappaggio genetico dei caratteri mendeliani nell’uomo. Studi di linkage. Metodi di mappaggio fisico. Metodi di mappaggio fisico ad alta risoluzione. Clonaggio posizionale. Clonaggio funzionale. L’esempio del gene della distrofia muscolare e della fibrosi cistica. Linkage disequilibrium. Clonaggio posizionale per gene candidato.Il progetto genoma umano: le tappe principali, implicazioni scientifiche, etiche e sociali.Genetica molecolare delle malattie umaneGenetica molecolare delle emoglobinopatie. Organizzazione funzionale e strutturale dei geni globinici. Mutazioni che causano alterazioni quantitative e qualitative dell’emoglobina. Basi molecolari delle talassemie e delle emoglobinopatie.Mutazioni da espansione instabile di ripetizioni. Caratteristiche genetiche delle malattie da mutazioni dinamiche. Il fenomeno dell’anticipazione. Approfondimenti sulla sindrome dell’X fragile.ImmunogeneticaSpecificità della risposta immunitaria. Cellule o organi specializzati del sistema immunitario. L’immunità umorale e cellulare. La specificità degli anticorpi e dei recettori delle cellule T.La selezione clonale: ontogenesi delle cellule B e T. La risposta della cellula B: struttura e funzione degli anticorpi. Le catene leggere e pesanti. Associazione combinatoria. Le famiglie multigeniche.L’unione V-J e V-D-J. La diversità al punto di unione, le regioni N, ipermutazione somatica. Regolazione dei riarrangiamenti. Anticorpi di membrana e di secrezione. La commutazione da IgM a IgD. La commutazione di classe oltre la IgD. Le interazioni con altre cellule del sistema immunitario. La risposta della cellula T. Geni e prodotti dell’MHC. Evoluzione della famiglia supergenica delle immunoglobuline.La genetica dei tumoriIl cancro. La cellula tumorale. Oncogeni virali e cellulari. Meccanismi di attivazione degli oncogeni cellulari. Traslocazioni cromosomiche e cancro. Funzioni delle proteine codificate dagli oncogeni. Ruolo degli oncogeni nella trasformazione cellulare.Geni oncosoppressori e tumori ereditari: il modello del retinoblastoma. Le proteine codificate dai geni oncosoppressori e la loro funzione nella fisiologia cellulare.micro RNA, ruolo fisiologico e nella patogenesi del cancro ( seminario)









































































































Locked="f

-R.L. Nussbaum, R.R. McInnes, H.F. Willard (2005),Thompson & Thompson Genetica in medicina, ed. Idelson-Gnocchi

-P.J Russell ( 2010)Genetica. Una prospettiva Molecolare, ed.Pearson

B. Lewin et al ( 2011) Il gene,edizione compatta, ed Zanichelli

Goldsby R.A, Kindt T.J. Kuby Immunologia (2007) UTET

- Strachan e A.P. Read (2007), Genetica Molecolare Umana, ed.UTET

Materiale didattico fornito dal docente

Breve riepilogo sulla struttura delle proteine: legame peptidico, struttura primaria, secondaria terziaria e quaternaria. Strutture supersecondarie. Concetto di dominio strutturale e funzionale. Il riavvolgimento delle proteine (protein folding). La termodinamica del fodling. Spontaneità del processo di folding. Il ruolo dei ponti -S-S- nella stabilizzazione delle strutture intermedie. Il “molten globule”. Il paradosso di Anfisen. Il folding assistito: le chaperonine. Classificazione delle chaperonine batteriche ed eucariotiche. Struttura e funzione di Gro-Es e Gro-El. Le chaperonpatie: esempi di patologie ereditarie basate sul “misfolding” proteico.Le mutazioni puntiformi: relazione tra modifiche strutturali e modifiche funzionali delle proteine. Le malattie rare: gli errori congeniti del metabolismo (IEM). Esempi di IEM correlati al metabolismo del glicogeno, al metabolismo di purine e pirimidine, al metabolismo degli acidi organici, al metabolismo degli amminoacidi e dell’N-acetilaspartato (NAA).Approcci per la diagnosi biochimico-clinica di IEM. Principali tecniche analitiche utili per la diagnosi biochimico-clinica di IEM. Le diagnosi prenatali e le diagnosi neonatali. Screening ristretti e screening allargati.Concetto di biomarker. Esempio di biomarkers comuni in biochimica clinica nella patologia diabetica: differenze tra la glicemia e l’HbA1-c. Ricerca di nuovi biomarkers in biochimica clinica per la diagnosi e prognosi di malattie neurodegenerative acute e croniche. Alterazioni biochimiche comuni in patologie neurodegenerative acute e croniche: il trauma cranico e la sclerosi multipla. L’NAA come biomarker di funzionalità neuronale. Nozioni sull’omeostasi dell’NAA.

Struttura e funzione delle proteine, Petsko e Ringe, Zanichelli; più materiale ad hoc che verrà distribuito durante il corso delle lezioni.

Sicurezza nel laboratorio di biologia molecolare clinica. Introduzione alle tecniche del DNA ricombinante. Purificazione e quantificazione degli acidi nucleici. Elettroforesi di macromolecole biologiche. Uso delle centrifughe. Uso delle principali nucleasi e di sonde molecolari. Clonaggio di molecole di DNA e produzione di specifiche proteine d’interesse terapeutico. Uso dellle tecniche di PCR a Real-Time PCR. Analisi degli RFLP . Tecniche di sequenziamento del DNA. Uso dei Chip e degli Array.

Prima parte:• Sviluppo delle conoscenze embriologiche• La riproduzione: caratteristiche generali• Tappe dello sviluppo embrionale e loro significato• Formazione degli assi embrionali in invertebrati e vertebrati• La gametogenesi: generalità• I protogoni: origine e loro comportamento• Plasma germinale e determinazione delle cellule germinali negli invertebrati e nei vertebrati• Migrazione delle cellule germinali• Spermatogenesi e spermioistogenesi• Ciclo dell’epitelio seminiferoMorfologia ed ultrastruttura del gamete maschile dei mammiferiIl processo di capacitazioneInfluenza ormonale nella maturazione del gamete maschileAspetti degenerativi dello spermatozooOrganizzazione e differenziamento del testicolo: struttura del tessuto interstiziale e del tubulo seminifero.• OogenesiOrganizzazione morfologica e strutturale del gamete femminile dei mammiferiLa follicologenesi , evoluzione del follicolo dopo l’ovulazione, atresia follicolareControllo ormonale della oogenesiAccrescimento dell’uovoRivestimenti ovulari dei mammiferi: struttura e funzioneOrganizzazione e differenziamento dell’ovario: generalità• La fecondazione: caratteristiche generaliFenomenologia della fecondazione nei mammiferi:chemiotassi, interazione tra i gameti, reazione acrosomale, penetrazione dello spermatozoo attraverso gli involucri ovulari, attivazione della cellula uovo• La segmentazione: generalitàMeccanismi di segmentazione: aspetti morfologici e molecolariLocalizzazioni citoplasmatiche dell’uovo e loro segregazioneLa segmentazione nei mammiferi: caratteristiche generali,compattazione, estrusione dalla zona pellucidaTrasporto dell’embrione durante la segmentazioneImpianto e deciduazioneOrganizzazione cellulare nel corso della embriogenesiI morfogeni e loro modalità di azione• La gastrulazioneMovimenti morfogenetici: formazione ed evoluzione dei tre foglietti embrionali• La neurulazione nei mammiferi• Ruolo degli ormoni nel differenziamento sessuale dei mammiferi• Annessi embrionali: organizzazione, struttura e funzione• Trapianti nucleari• Sviluppo a mosaico e sviluppo regolativoLa poliembrionia nei mammiferi• Induzione embrionale, attività molecolari nella specificità regionale dell’induzione• Specificazione, determinazione e differenziamento. I determinanti: loro localizzazione, composizione e modalità di azioneInterazioni cellulari in vicinanza ed interazioni cellulari a distanza.Seconda parte:• Topografia dell’apparato genitale femminile e maschile• Cenni di fisio-patologia dell’apparato genitale maschile e femminile• La sterilità e l’infertilità di coppia: dalla diagnosi alle terapie• Tecniche di medicina della riproduzione umana (P.M.A.)• Meccanismi e metodologie della stimolazione ovarica• Tecniche di diagnosi prenatale (amniocentesi ed analisi di globuli rossi fetali prelevati da sangue materno)• La fecondazione assistita:generalità e cenni storici• Organizzazione del laboratorio di fecondazione assistita:apparecchiature e terreni di coltura per gameti ed embrioni• Indagine di laboratorio del fattore maschile e prove di trattamento per ART. • Preparazione del seme per inseminazione intrauterina• Preparazione del liquido seminale per FIVET ed ICS (Fecondazione In Vitro Embrio Trasfer / Intra Citoplasmatica Spermio Iniezione)• Preparazione del fluido seminale per ICS• Preparazione dei terreni di coltura:• prelievo ovocitario ed inseminazione degli ovociti con la tecnica FIVET• Il micromanipolatore ed inseminazione degli ovociti con la tecnica ICS• Controllo della fertilizzazione degli ovociti e valutazione morfologica degli embrioni umani prima del trasfer:• tecnica di apertura della zona pellucida ed aspirazione dei frammenti citoplasmatici embrionali con il micromanipolatore (AHA: Assisted Hatching)• Il futuro: le cellule staminali• La diagnosi genetica di preimpianto ( PGD ) e la diagnosi pre-concezionale (PCD):• Diagnosi genetica di preimpianto : Principi e obiettivo• Storia della diagnosi genetica di preimpianto• Campi di applicazione : Malattie genetiche e cromosomiche a trasmissione ereditariaMalattie genetiche legate al sesso• Tecniche utilizzate : Fecondazione in vitro e biopsia embrionaria• Tecniche d’analisi genetica: PCR PrincipioMateriale e metodi Caratteristiche del laboratorio di DGPProblematica : Allele dropout Diagnosi Genetica Un esempio : Applicazione clinica della DGP per la -talassemia e la drepanocitosi FISH e CGH PrincipioMateriale e metodiApplicazioni• La Diagnosi genetica di preimpianto nel mondoApplicazione alternative della diagnosi genetica di preimpianto DGP e HLA typing DGP e predisposizione familiare al cancro DGP e selezione del sesso• Diagnosi preconcezionale : Caratteristiche generaliBiopsia del primo e secondo globulo polareTecniche d’analisi genetica, campi di applicazione e limiti• I limiti imposti dalla legge sulla diagnosi genetica di preimpianto e la diagnosi preconcezionaleConclusioni• La crioconservazione nella fecondazione in vitroCaratteristiche generali della crioconservazione• Il liquido seminale Materiale e metodi Applicazione cliniche• L’ovocita Materiale e metodi Applicazione cliniche• L’embrione Materiale e metodi Applicazione cliniche

Andreuccetti et al., Biologia dello sviluppo – McGraw-Hill ;
Gilbert- Biologia dello sviluppo –Zanichelli; P. Rosati –Embriologia generale dell’uomo – edi-ermes;
A Comparative Overview of Mammalian Fertilization – edited by Dunbar and O’Rand;
The Biological Basis of Early Human Reproductive Failure – edited by Van Blerkom

Parte I – Biologia Cellulare- Adesione cellulare.Generalità; organizzazione molecolare della superficie cellulare e della matrice extracellulare. Evoluzione dei meccanismi di adesione. Adesione cellula-cellula ed adesione cellula-matrice.Le molecole protagoniste dell’adesione cellulare: immunoglobuline, caderine, integrine, selectine. Interazioni ontogenetiche delle molecole di adesione.- Le cellule staminali:Generalità e cenni storici. Potenzialità differenziative delle cellule staminali.Cellule staminali embrionali (CSE).Cellule staminali germinali embrionali.Cellule staminali fetali.Cellule staminali amniotiche.Cellule staminali adulte (CSA).- Cellule staminali del midollo osseo: cellule staminali ematopoietiche e cellule staminali stromali.- Cellule staminali del cordone ombelicale.- Cellule staminali epiteliali.- Cellule staminali neuronali.La riprogrammazione nucleare:- Trasferimento nucleare (Somatic cell nuclear transfer, SCNT).- Fusione cellulare- Trasduzione dei fattori di trascrizione (Induced programmed stem cells, IPSc) Clonazione e clonazione terapeutica.Medicina rigenerativa.- Morte cellulare:Cenni storici sullo sviluppo del concetto di morte cellulare.Necrosi e suoi meccanismi.Morte cellulare programmata: apoptosi e anoikis. Alterazioni morfologiche dell’apoptosi. Fisiologia ed eventi biochimici dell’apoptosi. Vie di induzione dell’apoptosi. Modelli di studio dei processi apoptotici.

Cellule, B. Lewin et al., Ed. Zanichelli, 2008.

Fisiopatologia del sistema immunitario:Tolleranza e autoimmunità, riconoscimento del self e non self.Immunità contro i tumori e i trapianti, Risposte nei confronti di cellule trasformate e allogeniche.Ipersensibilità e malattie ad esse correlate.Immunodeficienze congenite e acquisite con relativa classificazione delle malattie causate da carenze di risposta immunitaria.Principali tecniche di laboratorio di uso comune in immunopatologia

Caratteristiche degli ormoni. Ormoni e tumori. Neuroendocrinologia. Ipotalamo.Ipofisi, Neuroipofisi. Fattori ipofisiotropi ipotalamici.Adenoipofisi. Ormoni dell’adenoipofisi e loro azione metabolica.Tiroide. Ormoni della tiroide. Azione ddegli ormoni tiroidei. TSH.Ghiandole surrenali. Controllo della secrezione surrenalica.Ghiandole paratiroidi. Il metabolismo del calcio.Gli ormoni sessuali.Il pancreas endocrino.Effetti fisiologici dell’insulina. Diabete.Organizzazione anatomo-funzionale del SNC.Sistema somatosensoriale, psicofisica delle sensazioni. Substrato anatomico della sensibilità somatica. Corda spinale. Sistema sensitivo ascendente. Fibre delle corna spinali. Laminazione spinale. Somatotopia spinale.Il talamo. Nuclei a proiezione specifica, associativi e a proiezione aspecifica.Vie della sensibilità somatica. Sistema anterolaterale. Sistema lemniscale. Sistema trigeminale.Corteccia cerebrale. Anatomia della corteccia. Cellule corticali. Potenziali evocati, primari e secondari. Codificazione dello stimolo periferico. Somatotopia corticale.Il dolore. Rappresentazione centrale del dolore. Analgesia.Sistemi motori. Circuiteria dei sistemi motori. Corda spinale, talamo, aree corticali. Interneuroni. Vie motici. Motoneuroni.I nuclei della base. Lloro connessioni efferenti ed afferenti. Morbo di Parkinson’s.Cervelletto. Anatomia dell cervelletto. Organizzazione cellulare. Afferenze. Vestibolo cerebellare: afferenze ed efferenze. Spinocerebello:afferenze ed efferenze, informazioni somatosensoriali. Cerebrocerebello. Patologie cerevellari.Apprendimento e memoria.Sistema nervoso vegetativo.Riflessi condizionati.

Testi forniti dal docente

Metodologia EpidemiologicaPublic Health per il trasferimento delle acquisizioni della ricerca negli interventi di prevenzione e promozione della salute e nelle policies. Demografia e biostatistica per l’approccio epidemiologico. Fonti e modalità di raccolta dei dati. La definizione di caso. Elaborazione e presentazione dei dati. Misure di frequenza (tassi grezzi e specifici, tassi standardizzati, prevalenza, l’incidenza cumulativa o rischio e il tasso di incidenza). Indicatori delle condizioni di salute della popolazione: fecondità, natalità, speranza di vita, mortalità, mortalità infantile, neonatale e perinatale, letalità, tasso di sopravvivenza, eventi sentinella.Misurare gli eventi: importanza di un denominatore - proporzioni e tassi - definizione di prevalenza - definizione di incidenza - densità di incidenza. Tassi grezzi e specifici - esempi di tassi quali indicatori demografici e sanitari (mortalità, natalità, mortalità infantile, ecc.) – standardizzazione dei tassi con metodo diretto e indirettoIl campionamento: significato degli studi campionari - metodi di campionamento - cos'è l'inferenza statistica.Studiare le relazioni causa-effetto: Basi concettuali del disegno dello studio epidemiologico - studio pilota - impostare uno studio epidemiologico - metodologie di indagine – gli studi descrittivi – gli studi ecologici – gli studi trasversali - gli studi di coorte - gli studi caso-controllo - le misure di associazione. La valutazione del rischio: fattori di rischio (componenti genetiche, ambientali e comportamentali). Rischio assoluto, relativo e attribuibile. Misure di associazione e rapporto causa-effetto. Inferenza causale e fattori di confondimento. Misure di impatto sulla popolazione. Fattori di rischio multipli e interazione. Bias e confondenti negli studi analitici - OR "aggiustati" - cenni sulle analisi multivariate. Interpretare i risultati di uno studio analitico - significato dell'associazione fra fattori di rischio e patologie - misure di impatto sulla popolazione (rischio attribuibile, frazione eziologica, ecc).Epidemiologia sperimentale: gli studi sperimentali - efficacia clinica - modelli di studio sperimentale (trial preventivi, field trials e community trials; trial clinici).Gli screening: significato di prevenzione secondaria - modelli di screening - valutare la validità di un test in funzione dello screening: sensibilità, specificità, valore predittivo. Valutazione del target dello screening. Calcolo del NNT, NNS.L'indagine su un’epidemia: studio di un'epidemia - metodi di analisi dei dati – curva epidemica. Il protocollo operativo. La gestione degli outbreak.L’indagine sui cluster di eventi sanitari: definizioni ed esempi – identificazione di un cluster - limiti delle indagini su cluster di eventi sanitari – analisi dei dati.I questionari in epidemiologia: preparare un questionario - organizzare i dati per l'input - validare le risposte.Epidemiologia delle vaccinazioni: Le origini delle basi scientifiche della vaccinazione. Modelli sperimentali di vaccinologia. La sorveglianza del tasso di copertura vaccinale. Possibili obiettivi dei programmi di vaccinazione: protezione dell’individuo a rischio; controllo; eliminazione; eradicazione. Valutazione di efficacia ‘sul campo’ delle vaccinazioni.Journal club revisione critica di recenti articoli della letteratura epidemiologica internazionaleLaboratorio di Epidemiologia applicata IgieneEpidemiologia e prevenzione delle infezioni del tratto respiratorio Epidemiologia e prevenzione delle infezioni trasmesse per via parenterale o sessualeEpidemiologia e prevenzione delle infezioni veicolate dagli alimenti e zoonosiEpidemiologia e prevenzione delle infezioni emergenti e trasmesse da vettori Epidemiologia e prevenzione delle infezioni prevenibili mediante vaccinazioneEpidemiologia e prevenzione delle infezioni acquisite in ambito assistenziale (HAI, hospital acquired infections). I programmi di sorveglianza e i network nazionali ed europei.Epidemiologia e prevenzione delle malattie cardiovascolariEpidemiologia e prevenzione del diabete mellito e dell’obesitàEpidemiologia e prevenzione dei tumori maligni Prevenzione preconcezionale e prenatale Indicatori di salute materna. Mortalità - Morbosità - Abortività.Le malformazioni congenite Approccio metodologico: il disegno dello studio epidemiologico. Impatto dell’alimentazione sull’incidenza dei difetti congeniti (difetti del tubo neurale, spina bifida, schisi orali). Sindrome di Down. Suscettibilità genetica. Interventi di prevenzione.Genomica in Sanità pubblica Le 4 fasi della ricerca traslazionale. I modelli di valutazione dei test genetici/genomici.

F Faggiano, F Donato, F Barbone. Manuale di Epidemiologia per la Sanità Pubblica. Centro Scientifico Editore
PL Lopalco, AE Tozzi Epidemiologia facile. Il Pensiero Scientifico Editore
Checcacci L, Meloni C, Pellissero G.: IGIENE Casa Editrice Ambrosiana

Farmacologia generale (farmacodinamica, farmacocinetica), farmacologia cellulare e molecolare, farmacologia dei sistemi fisiologici integrati, concetti essenziali di chemioterapia.